預(yù)期用途:
用于精子樣品的制備。
使用方法:
上游法:
用一支無(wú)菌無(wú)毒的移液管,吸取1 mL精液到已標(biāo)記了患者身份的試管中。用 2.0 mL精子洗滌液覆蓋精液,將試管置于+37℃,無(wú)二氧化碳培養(yǎng)箱中(或者加熱至+37℃)恒溫培養(yǎng) 30-60 分鐘。吸取上層液體并轉(zhuǎn)移到一支干凈試管中,再加入 5.0 mL 精子洗滌液,混勻并在≤1000 轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心10分鐘。棄去上清液,向沉淀中加入 5.0 mL 的精子洗滌液(宮內(nèi)人工授精)或者平衡受精培養(yǎng)液(體外受精)使其重懸,然后再離心 1 次。棄去上清液,向沉淀中加入 0.5-1.0 mL 的精子洗滌液(宮內(nèi)人工授精)或者受精培養(yǎng)液(體外受精)制成懸浮液待用。
梯度分離法:
精子洗滌液與精子梯度液混合分別獲得90%和45%的梯度分離液(或者僅制備 90% 的梯度分離液)。然后用無(wú)菌無(wú)毒的吸管移取 1.5 mL 90%的梯度分離液到圓錐形的離心管中,再移取 1.5 mL 45% 的梯度分離液慢慢置于其上層(或者只有 90% 梯度分離液層)。最后,將精液慢慢地置于液面頂層,1500-2000轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心20分鐘。棄去殘余精液和兩層上清液,注意不要讓殘余精液遺留在試管壁上。向精子沉淀物中加入盡可能少的 90% 梯度分離液,再將其轉(zhuǎn)移至盛有 5 mL 精子洗滌液溶液的圓錐形無(wú)菌試管中。1500-2000 轉(zhuǎn)/分鐘的條件下離心 10 分鐘。棄去上清液,用精子洗滌液再洗一次。第二次清洗后,向沉淀中加入0.5-1.0 mL的精子洗滌液(宮內(nèi)人工授精)或者平衡授精液(體外授精)制成懸浮液待用。
精子的浮游分離法:
請(qǐng)依照RBC 精子浮游器的使用方法進(jìn)行精子分離和純化。