本產品已在美國專利商標局(USPTO)注冊,專為玻璃化而設計,在人類輔助生殖技術中用于解凍卵子、不同階段的胚胎和生殖組織(卵巢和睪丸)。
使用方法(微滴法):
1.將解凍液(TS)、稀釋液(DS)和洗滌液(WS)從2-4℃冰箱中取出,平衡至室溫(23-27℃)。
2.使用之前,取約300 μL 的TS至已標記的冷凍解凍板或者組織培養(yǎng)皿中預熱至37℃。
3. 在無菌室溫條件下,取DS和WS溶液各兩滴(每滴50-100μL)分別置于冷凍解凍板或者胚胎培養(yǎng)皿(3002)中,分別記為DS1、DS2與WS1、WS2(見圖2)。
4.從液氮罐中取出裝有患者信息載桿的鋁架,放置在一個盛有液氮的聚乙烯泡沫盒或其他容器中,使iVitri?-straw或-EZ載桿完全浸沒在液氮中,并核查標簽上患者的信息。
5.用長鑷子夾住iVitri?-straw或-EZ載桿主體,并將其從鋁架中取出。
6.用長鑷子夾住載桿套并拉出,此過程始終在液氮中進行。
7.迅速從液氮中取出iVitri?-straw 或-EZ載桿的桿體(標志面朝下),在顯微鏡載物臺或層流工作臺上,面朝下置于預熱的TS液滴中,于37℃條件下平衡1分鐘(圖1),然后將卵母細胞或胚胎從TS轉移至DS1和DS2中分別平衡2分鐘(圖2)。
8.將卵母細胞或胚胎從DS轉移至WS1和WS2中,分別放置2分鐘(圖2),然后在培養(yǎng)基中洗滌一次,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
補充說明:
若卵母細胞解凍時,需增加以下兩步操作:
1) 在TS解凍之后,將卵母細胞置于TS: DS(1:1)混合液滴中平衡3 分鐘。
2) 在DS第二次平衡之后,將卵母細胞置于DS:WS(1:1)混合溶液中平衡2分鐘。